В июне 2025 года в лаборатории молекулярной вирусологии Сеченовского университета стартовал первый этап проекта по разработке генной терапии хороидеремии.
Исследователи приступили к созданию вирусных векторов, предназначенных для эффективной экспрессии гена CHM в клетках сетчатки глаза человека.
Проект стартовал с этапа компьютерного дизайна и моделирования оптимального гена CHM для генной терапии хороидеремии.
На основе созданных цифровых прототипов были получены синтетические нуклеотидные последовательности гена CHM. Гены были синтезированы в составе плазмидных векторов и успешно прошли входной контроль качества.
Далее, полученные гены были заклонированы в экспрессионные вектора с использованием молекулярного клонирования. Успешность клонирования и отсутствие генетических дефектов в генетических конструкциях проверили нуклеотидным секвенированием.
Проведено первичное тестирование экспресии гена CHM на культуре клеток HEK293T. Задача заключалась в идентификации генной конструкции, демонстрирующей наивысший уровень экспрессии белка CHM. По результатам скрининга были выбраны наиболее перспективные версии вектора.
Для дальнейшего анализа экспрессии белка REP1, кодируемого геном CHM, были заказаны специфические антитела.
Ожидается, что реагенты поступят в лабораторию в январе 2026 года, что позволит подтвердить идентичность белка REP-1 производимого с использованием созданных генетических конструкций.
После доставки антител планируется подтверждение эффективности выбранного вирусного вектора на культурах пигментного эпителия сетчатки (ARPE-19).
Результаты работ позволят выбрать наиболее эффективный AAВ вектор, кодирующий ген CHM для дальнейшего тестирования локализации белка и функциональности на животных.
Исследователи приступили к созданию вирусных векторов, предназначенных для эффективной экспрессии гена CHM в клетках сетчатки глаза человека.
Проект стартовал с этапа компьютерного дизайна и моделирования оптимального гена CHM для генной терапии хороидеремии.
На основе созданных цифровых прототипов были получены синтетические нуклеотидные последовательности гена CHM. Гены были синтезированы в составе плазмидных векторов и успешно прошли входной контроль качества.
Далее, полученные гены были заклонированы в экспрессионные вектора с использованием молекулярного клонирования. Успешность клонирования и отсутствие генетических дефектов в генетических конструкциях проверили нуклеотидным секвенированием.
Проведено первичное тестирование экспресии гена CHM на культуре клеток HEK293T. Задача заключалась в идентификации генной конструкции, демонстрирующей наивысший уровень экспрессии белка CHM. По результатам скрининга были выбраны наиболее перспективные версии вектора.
Для дальнейшего анализа экспрессии белка REP1, кодируемого геном CHM, были заказаны специфические антитела.
Ожидается, что реагенты поступят в лабораторию в январе 2026 года, что позволит подтвердить идентичность белка REP-1 производимого с использованием созданных генетических конструкций.
После доставки антител планируется подтверждение эффективности выбранного вирусного вектора на культурах пигментного эпителия сетчатки (ARPE-19).
Результаты работ позволят выбрать наиболее эффективный AAВ вектор, кодирующий ген CHM для дальнейшего тестирования локализации белка и функциональности на животных.
